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體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗儀

  體外哺乳動物細胞染色體畸變試驗儀
 
  一、 儀器介紹
 
  實驗目的:
 
  本試驗檢測受試物是否引起培養的哺乳動物細胞染色體畸變,以評價受試物致突變的可能性
 
  實驗概述:
 
  在加入和不加入代謝活化系統的條件下,使培養的哺乳動物細胞暴露于受試物中。用中期分裂相阻斷劑(如秋水仙素或秋水仙胺)處理,使細胞停止在中期分裂相,隨后收獲細胞,制片,染色,分析染色體畸變。
 
  大部分的致突變劑導致染色單體型畸變,偶有染色體型畸變發生。雖然多倍體的增加可能預示著有染色體數目畸變的可能,但本方法并不適合用于測定染色體的數目畸變。
 
  應用范圍
 
  應用于科研、農業、衛生、教育、霧霾狀態可吸入顆粒染毒效果研究等各個領域
 
  二、試驗流程
 
  1)細胞培養
 
  選擇合適細胞系,在含血清培養基中培養至對數生長期。
 
  2)受試物處理
 
  設置多個濃度組(需包括細胞毒性評估,如50%生長抑制濃度)
 
  陽性對照
 
  陰性對照(溶劑對照)
 
  3.)代謝活化系統(S9混合液)
 
  模擬體內代謝,用于檢測需代謝激活的致突變物(如加Aroclor 1254誘導的大鼠肝S9)
 
  4.)采樣時間
 
  短期處理:1個細胞周期(通常24小時,含或不含S9)
 
  長期處理:覆蓋多個細胞周期(如48小時)
 
  5)染色體制備
 
  秋水仙素(或秋水仙胺)處理:阻斷中期細胞。
 
  低滲處理(KCI溶液)使細胞膨脹。
 
  固定(甲醇:冰醋酸=3:1)后滴片,Giemsa染色。
 
  6)鏡檢分析
 
  顯微鏡下觀察至少200個中期分裂相,記錄畸變類型和頻率。
 
  三、儀器與試劑
 
  關鍵儀器:
 
  培養箱、生物安全柜、離心機、顯微鏡(配備油鏡和圖像分析系統)
 
  染色體自動掃描儀(可選)
 
  主要試劑:
 
  細胞培養基、胎牛血清。
 
  秋水仙素、Giemsa染液、S9混合液。
 
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主營產品:老化試驗箱,耐磨測試儀,燃燒測試儀,皮革測試儀

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